Bactérias
Os microorganismos
são encontrados em praticamente todos os ambientes naturais,
tais como solo, ar, água, plantas, animais, corpo humano,
alimentos e esgoto. Apresentam-se sob a forma de comunidades
(conjunto de população de espécies), e para que possamos estuda-los
no laboratório, necessitamos separá-los individualmente, para
que, em cultura formem populações clonadas (iguais, puras),
conhecidas como culturas puras (colônias).
Colônias
Colônias
em placa de agar
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Tamanho- O tamanho
das colônias varia desde dimensões muito pequenas até
colônias muito grandes.
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Bordos- A periferia
das colônias bacterianas forma muitos desenhos diferentes,
dependendo da espécie.
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Elevação- As colônias
podem ser muito finas (achatadas) ou espessas (elevadas).
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Pigmentação- As
colônias podem ser coradas (pigmentadas) ou não (não-pigmentadas).
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Detalhes ópticos-
As colônias bacterianas podem ser opacas, translúcidas
ou opalescentes.
Colônias
em caldo nutritivo
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Quantidade de
crescimento- Escassa, moderada ou abundante.
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Distribuição do
crescimento no meio de cultura- Crescimento uniformemente
dividido (nitidamente turvo); crescimento confinado à
superfície do meio, como uma espuma ou filme ( película);
ou crescimento acumulado como sedimento, que pode ser
granuloso ou viscoso.
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Odor- Pode ser
pútrido, de frutas ou aromático, ou desprezível.
Culturas puras
As culturas
puras representa uma condição artificial para o crescimento
das bactérias e de outros microorganismos, imposta pelas manipulações
laboratoriais. No entanto, a determinação das características
de uma espécie particular de microorganismos exige seu isolamento
laboratorial como cultura pura. Existe uma variedade de técnicas
através das quais as diferentes espécies de um espécime natural
podem ser isoladas e desenvolvidas em forma pura.
Esterilização
Calor
úmido- O calor, sob a forma de vapor d`água sob pressão
é o agente mais prático e seguro para fins de esterilização,
proporcionando temperaturas mais elevadas que as obtidas por
ebulição. Além disso, apresenta as vantagens do rápido crescimento,
penetrabilidade e grande umidade, o que facilita coagulação
das proteínas.
O aparelho
que utiliza o vapor de água sob pressão regulada chama-se
autoclave.
Calor
seco- É recomendada quando o contato direto ou completo
do vapor de água sob pressão com o material a ser esterilizado
é considerado como indesejável ou improvável, o que é verdadeiro
para certos tipos de vidraria laboratorial, óleos, pós e substâncias
similares.
O aparelho
que utiliza o calor seco é chamado de Forno de Pasteur.
Exigências
nutritivas
Todas
as formas de vida, dos microrganismos aos seres humanos, repartem
certas exigências nutritivas, em termos de substâncias químicas
indispensáveis ao seu crescimento e ao seu funcionamento normal.
As seguintes observações consubstanciam o que foi dito e ilustram
a grande diversidade de tipos nutritivos existentes entre
as bactérias.
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Todos os organismos
vivos requerem uma fonte de energia.
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Todos os organismos
vivos requerem alguma forma da carbono; todos exigem ao
menos, pequenas quantidades de dióxido de carbono, mas
a maior parte requer certos compostos orgânicos de carbono,
como açúcares e outros carboidratos.
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Todos os organismos
vivos exigem alguma forma de nitrogênio. Sob este ponto
de vista, as bactérias são muito versáteis; alguns tipos
usam o nitrogênio atmosférico, alguns crescem na presença
de compostos nitrogenados inorgânicos e outros, enfim,
retiram seu nitrogênio das proteínas ou de praticamente
qualquer composto orgânico nitrogenado que existe na natureza.
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Todos os organismos
vivos necessitam de enxofre e fósforo. Algumas bactérias
exigem compostos orgânicos de enxofre, outras são capazes
de utilizar os compostos inorgânicos, enquanto um terceiro
grupo pode mesmo utilizar o enxofre elementar. O fósforo
é suprido, usualmente, sob a forma de fosfatos.
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Todos os organismos
vivos necessitam de vários elementos minerais para seu
desenvolvimento normal (sódio, potássio, cálcio, magnésio,
manganês, ferro, zinco cobre, fósforo e cobalto).
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Todos os organismos
vivos contêm vitaminas ou compostos semelhantes às vitaminas.
As bactérias utilizam vitaminas para seus processos metabólicos
normais, algumas são capazes de sintetizar todas as vitaminas
necessárias, a partir de outros compostos do meio.
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Todos os organismos
requerem água para seu desenvolvimento. Para as bactérias,
todos os nutrientes devem ser dissolvidos em água, antes
de poderem ser absorvidos.
Fototróficos
X Quimiotróficos
Alguns
seres vivos, como as plantas verdes, podem utilizar energia
radiante e são denominados fototróficos. As formas de vida
incapazes de utilizar a energia radiante, como a vida animal,
dependem da oxidação de compostos químicos para a obtenção
da energia. Por isso recebem a denominação de quimiotróficos.
Esses dois tipos de comportamentos existem entre as bactérias
(fototróficas e quimiotróficas).
As plantas
usam o dióxido de carbono, convertendo-o, pele fotossíntese,
em carboidratos. Muitas bactérias também exigem apenas o dióxido
de carbono como sua fonte nutritiva e, falando sob o ponto
de vista nutritivo, tais organismos são autotróficos. Caso
possam obter sua energia da luz, recebem o nome de fotoautotróficos;
se a energia for obtida pela oxidação de compostos químicos
são chamados de quimioautotróficos. Outras bactérias são semelhantes
aos animais, no sentido de serem incapazes de utilizar o dióxido
de carbono como única fonte de carbono e de dependerem de
organismos autotróficos para a produção de carboidratos e
outros compostos utilizados como alimentos. As formas vivas
que exigem uma fonte orgânica de carbono são heterotróficas.
Meios
de cultivo (solidificados X semi-solidificadosX líquidos)
Os meios
sólidos, como fatias de batata, são utilizados, ocasionalmente,
para o cultivo especial de bactérias. Os meios solidificados
(que podem ser liquefeitos) são exemplificados pelo ágar nutritivo.
Os meios semi-sólidos contêm pequena quantidade de ágar (0,5%
ou menos), o que lhes dá uma consistência típica. Por fim,
os meios líquidos são representados pelo caldo nutritivo e
pelo leite desnatado.
Meios
de cultivo (enriquecido X seletivo)
Meios
enriquecidos- A adição de sangue, soro ou extrato de tecidos
animais ou vegetais ao caldo ou ágar nutritivos proporciona
nutrientes acessórios, de modo que o meio passa a permitir
o crescimento de heterotróficos fastidiosos.
Meios
seletivos- A adição de certas substâncias químicas específicas
ao ágar nutritivo previne o crescimento de um grupo de bactérias
sem agir sobre outras. O cristal violeta, por exemplo em uma
dada concentração, impede o crescimento de bactérias gram-positivas,
sem afetar o crescimento das gram-negativas. Em princípio,
pode-se selecionar bactérias que crescem em organismos inusitados,
simplesmente adicionando esses compostos ao meio, com a omissão
de qualquer outra fonte de carbono.
Temperatura
de encubação
Uma vez
que todos os processos de crescimento dependem de reações
químicas e que essas são influenciadas pela temperatura, o
crescimento bacteriano pode ser profundamente afetado por
esta condição. A temperatura determinará, em parte, o ritmo
e a quantidade total do crescimento do organismo. As variações
térmicas também podem influenciar os processos metabólicos
e a morfologia celular.
Cada espécie
de bactérias cresce sob temperaturas situadas em faixas características.
Assim sendo, as bactérias são classificadas nos seguintes
grupos:
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Psicrófilas: são
capazes de crescer a 00C
ou menos, embora seu ótimo esteja dependendo de temperaturas
mais elevadas, próximas de 150C
ou 200C.
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Mesófilas: crescem
melhor numa faixa de 25 a 400C.
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Termófilas: crescem
melhor a temperaturas de 45 a 600C.
Exigências
atmosféricas
Os principais
gases que afetam o crescimento bacteriano são o oxigênio e
o dióxido de carbono. Como as bactérias apresentam grande
variedade de resposta ao oxigênio livre, é conveniente dividi-las
em quatro grupos:
Aeróbicas:
crescem na presença de oxigênio livre.
Anaeróbicas:
crescem na ausência de oxigênio livre.
Anaeróbicas
facultativas: crescem tanto na presença quanto na ausência
de oxigênio
livre.
Microaerófilas:
crescem na presença de quantidades pequenas de oxigênio livre.
O crescimento
de organismos aeróbicos em tubos ou em pequenos frascos, após
a incubação do meio sob condições atmosféricas normais é,geralmente,
satisfatório. Quando se deseja obter grandes quantidades de
bactérias aeróbicas, porém, é vantajoso aumentar a exposição
do meio à atmosfera.
Bactérias
(formas e arranjos)
Embora
existam milhares de espécies bacterianas diferentes, os organismos
isolados apresentam uma das três formas gerais: esférica,
em bastonete e espiralada.
As células
bacterianas esféricas são chamadas de cocos, e muitas bactérias
que pertencem a esta categoria apresentam dois tipos de arranjos,
de grande importância em seu diagnóstico.
Arranjos
característicos dos cocos: diplococos- as células se dividem
num único plano e permanecem unidas predominantemente aos
pares. Estreptococos- as células se dividem num único plano
e permanecem unidas sob a forma de cadeias. Tetracocos- as
células se dividem em dois planos, formando grupos característicos
de quatro células. Estafilococos- as células se dividem em
três planos, de modo irregular, produzindo "cachos"
de cocos. Sarcinas- as células se dividem em três planos,
de modo regular, produzindo arranjos cúbicos das células.